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PCR仪详解:原理、使用方法、常见故障及维修方法,附带维护保养指南

PCR仪概述

PCR仪(Polymerase Chain Reaction Instrument)是一种利用聚合酶链式反应(PCR)技术,对特定DNA片段进行体外扩增的精密仪器。PCR技术因其高度敏感、高效和高特异性,被广泛应用于分子生物学、医学诊断、遗传学研究和犯罪学等领域。PCR仪通过精确控制温度循环,实现DNA的双链分离、引物结合及新链合成,从而快速扩增目标DNA片段。

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原理

PCR技术的基本原理依赖于DNA双链在高温下变性成单链,低温下引物与单链模板特异性结合,并在适中的温度下由DNA聚合酶催化合成新链。这一过程通过变性、退火和延伸三个步骤的循环进行,理论上经过N次循环,特定DNA片段可扩增至2^N倍。PCR仪作为温控设备,能够精确控制每个循环中的温度和时间,确保PCR反应的顺利进行。

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使用方法

  1. 实验准备:准备所需的试剂和仪器,包括模板DNA、引物、dNTPs、缓冲液和酶等,确保所有试剂精确配制并符合实验要求。

  2. 样品处理:对模板DNA进行纯化,去除可能的抑制物,并根据实验需求调整浓度。

  3. 反应体系配制:按照实验手册或设计方案,精确配制PCR反应体系,确保每种试剂的用量准确。

  4. 设置程序:在PCR仪上设置反应程序,包括变性、退火和延伸的温度及时间,以及循环次数。

  5. 放入样品:将配制好的反应体系加入PCR管中,放入PCR仪的相应位置。

  6. 启动反应:启动PCR仪,按照设定的程序进行反应。

  7. 结果分析:反应结束后,通过电泳等方法分析扩增产物,判断实验结果。


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常见故障及维修方法

  1. 温度不稳定

    • 现象:显示温度与实际设定不符或无法达到设定温度。

    • 原因:加热/冷却系统故障,如加热元件、风扇或传感器损坏。

    • 维修方法:检查并更换损坏的部件,清洁加热盖,保持周围环境通风。

  2. 反应混合物沉积

    • 现象:PCR管内反应混合物沉积在管壁上。

    • 原因:反应液混合不均匀或离心不彻底。

    • 解决方法:确保充分混合反应液,并在每次使用前轻轻离心管子。

     

  3. 漏液

    • 现象:PCR管子漏液。

    • 原因:封口不严或使用过期的密封膜。

    • 解决方法:更换新的密封膜,确保正确封口,避免移动或震动PCR板。

  4. 电源问题

    • 现象:仪器无法启动或突然断电。

    • 原因:电源插头未插紧或电源线路故障。

    • 解决方法:检查电源插头和线路,必要时更换电源插座或寻求专业维修帮助。

  5. 程序失败

    • 现象:程序运行失败,无法完成预定循环。

    • 原因:计算机软件设置错误、试剂盒质量问题或操作步骤不正确。

    • 解决方法:检查程序设置,更换新的试剂盒,并按照操作手册正确操作。

  6. 灯泡故障

    • 现象:紫外灯泡损坏,无法可视化DNA条带。

    • 解决方法:及时更换损坏的灯泡,确保准确读取结果。

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维护保养

  1. 定期清洁:使用无绒布块蘸取75%酒精清洁仪器表面和样品台,保持通风口畅通无阻。

  2. 温度校准:定期检查PCR仪的温度准确性,使用温度验证试剂盒进行检测,必要时由专业人员重新校准。

  3. 热盖检查:定期检查热盖是否损坏或密封不良,及时更换或调整以确保试剂不蒸发。

  4. 样品槽清洁:定期清洗样品槽,去除可能的污染物,确保实验结果准确可靠。

  5. 电源管理:在不使用PCR仪时,建议拔下电源插头,避免长时间待机对仪器造成损害。

  6. 记录管理:及时填写设备使用记录,记录每次实验的条件和结果,以便追溯和分析。

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  通过以上措施,可以有效延长PCR仪的使用寿命,提高实验结果的准确性和可靠性。同时,遇到复杂故障时,建议及时联系容济机电的技术支持或专业维修人员进行处理。

容济机电维修过的PCR仪品牌和型号

   1、Thermo Fisher Scientific

(1)Applied Biosystems系列:

   A、Veriti 96-Well Thermal Cycler

   B、SimpliAmp Thermal Cycler

   C、ProFlex PCR System

   D、QuantStudio 3 Real-Time PCR System

   E、QuantStudio 5 Real-Time PCR System

   F、QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System

   G、QuantStudio 7 Flex Real-Time PCR System

   H、QuantStudio 12K Flex Real-Time PCR System

   2、Bio-Rad

(1)T100系列:T100 Thermal Cycler

(2)S1000系列:S1000 Thermal Cycler

(3)C1000 Touch系列:C1000 Touch Thermal Cycler

(4)CFX系列:CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System,

                         CFX384 Touch Real-Time PCR Detection System,

                         CFX Opus 96 Real-Time PCR System,

                         CFX Opus 384 Real-Time PCR System,

   3、 Eppendorf

(1)Mastercycler系列:Mastercycler Nexus,Mastercycler X50,Mastercycler                                             Pro,Mastercycler Gradient

   4、 Roche

(1)LightCycler系列:LightCycler 96 System,LightCycler 480 System II,

                                     LightCycler Nano,LightCycler 1536 Real-Time PCR                                                 System

   5、Agilent Technologies

(1)SureCycler 8800: 高性能PCR仪

(2)AriaMx Real-Time PCR System: 实时荧光定量PCR系统

   6、Qiagen

(1)Rotor-Gene Q: 实时荧光定量PCR系统

(2)QIAquant 96 5plex: 实时荧光定量PCR系统

   7、Analytik Jena

(1)Biometra TAdvanced: 高性能PCR仪

(2)Biometra TRobot: 自动化PCR系统

(3)qTOWER³: 实时荧光定量PCR系统

   8、Takara Bio

(1)Thermal Cycler Dice Touch: 高性能PCR仪

(2)Thermal Cycler Dice Real Time System III: 实时荧光定量PCR系统

   9、Bioer Technology

(1)GeneMax系列:GeneMax

(2)LineGene系列:LineGene 9600 Plus,LineGene K Plus

(3)XP Cycler: 高性能PCR仪

   10、Techne (Bibby Scientific)

(1)TC-3000系列:TC-3000 Thermal Cycler,

(2)TC-5000系列:TC-5000 Thermal Cycler

(3)Prime系列:Prime Thermal Cycler,PrimeG Gradient Thermal Cycler

   11、Abbott

(1)m2000系列:m2000 RealTime System

   12、Cepheid

(1)SmartCycler II: 实时荧光定量PCR系统

(2)GeneXpert系列:GeneXpert Infinity,GeneXpert IV,GeneXpert XVI

   13、 Fluidigm

(1)Biomark HD: 实时荧光定量PCR系统

(2)Juno System: 高通量PCR系统

   14、Illumina

(1)Eco Real-Time PCR System: 实时荧光定量PCR系统

   15、Bioneer

(1)Exicycler 96: 实时荧光定量PCR系统

(2)MyCycler: 高性能PCR仪

   16、盛赛尔(Sansure Biotech)

(1)MA-6000系列:MA-6000 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

(2)MA-688系列:MA-688 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

(3)MA-7000系列:MA-7000 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

(4)SLAN系列:SLAN-96P Real-Time PCR System,SLAN-48P Real-Time PCR                                  System

(5)San-Q系列:San-Q5 Real-Time Quantitative Thermal Cycler,

                             San-Q3 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

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   容济机电公司长期维修PCR仪,拥有接近30年的维修经验,可以快速抢修好各类仪器,另外回收和销售各类PCR仪,欢迎咨询。 

 
 
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