PCR仪概述
PCR仪(Polymerase Chain Reaction Instrument)是一种利用聚合酶链式反应(PCR)技术,对特定DNA片段进行体外扩增的精密仪器。PCR技术因其高度敏感、高效和高特异性,被广泛应用于分子生物学、医学诊断、遗传学研究和犯罪学等领域。PCR仪通过精确控制温度循环,实现DNA的双链分离、引物结合及新链合成,从而快速扩增目标DNA片段。
原理
PCR技术的基本原理依赖于DNA双链在高温下变性成单链,低温下引物与单链模板特异性结合,并在适中的温度下由DNA聚合酶催化合成新链。这一过程通过变性、退火和延伸三个步骤的循环进行,理论上经过N次循环,特定DNA片段可扩增至2^N倍。PCR仪作为温控设备,能够精确控制每个循环中的温度和时间,确保PCR反应的顺利进行。
使用方法
实验准备:准备所需的试剂和仪器,包括模板DNA、引物、dNTPs、缓冲液和酶等,确保所有试剂精确配制并符合实验要求。
样品处理:对模板DNA进行纯化,去除可能的抑制物,并根据实验需求调整浓度。
反应体系配制:按照实验手册或设计方案,精确配制PCR反应体系,确保每种试剂的用量准确。
设置程序:在PCR仪上设置反应程序,包括变性、退火和延伸的温度及时间,以及循环次数。
放入样品:将配制好的反应体系加入PCR管中,放入PCR仪的相应位置。
启动反应:启动PCR仪,按照设定的程序进行反应。
结果分析:反应结束后,通过电泳等方法分析扩增产物,判断实验结果。
常见故障及维修方法
温度不稳定
反应混合物沉积
漏液
电源问题
程序失败
灯泡故障
现象:紫外灯泡损坏,无法可视化DNA条带。
解决方法:及时更换损坏的灯泡,确保准确读取结果。
维护保养
定期清洁:使用无绒布块蘸取75%酒精清洁仪器表面和样品台,保持通风口畅通无阻。
温度校准:定期检查PCR仪的温度准确性,使用温度验证试剂盒进行检测,必要时由专业人员重新校准。
热盖检查:定期检查热盖是否损坏或密封不良,及时更换或调整以确保试剂不蒸发。
样品槽清洁:定期清洗样品槽,去除可能的污染物,确保实验结果准确可靠。
电源管理:在不使用PCR仪时,建议拔下电源插头,避免长时间待机对仪器造成损害。
记录管理:及时填写设备使用记录,记录每次实验的条件和结果,以便追溯和分析。
通过以上措施,可以有效延长PCR仪的使用寿命,提高实验结果的准确性和可靠性。同时,遇到复杂故障时,建议及时联系容济机电的技术支持或专业维修人员进行处理。
容济机电维修过的PCR仪品牌和型号
1、Thermo Fisher Scientific
(1)Applied Biosystems系列:
A、Veriti 96-Well Thermal Cycler
B、SimpliAmp Thermal Cycler
C、ProFlex PCR System
D、QuantStudio 3 Real-Time PCR System
E、QuantStudio 5 Real-Time PCR System
F、QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System
G、QuantStudio 7 Flex Real-Time PCR System
H、QuantStudio 12K Flex Real-Time PCR System
2、Bio-Rad
(1)T100系列:T100 Thermal Cycler
(2)S1000系列:S1000 Thermal Cycler
(3)C1000 Touch系列:C1000 Touch Thermal Cycler
(4)CFX系列:CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System,
CFX384 Touch Real-Time PCR Detection System,
CFX Opus 96 Real-Time PCR System,
CFX Opus 384 Real-Time PCR System,
3、 Eppendorf
(1)Mastercycler系列:Mastercycler Nexus,Mastercycler X50,Mastercycler Pro,Mastercycler Gradient
4、 Roche
(1)LightCycler系列:LightCycler 96 System,LightCycler 480 System II,
LightCycler Nano,LightCycler 1536 Real-Time PCR System
5、Agilent Technologies
(1)SureCycler 8800: 高性能PCR仪
(2)AriaMx Real-Time PCR System: 实时荧光定量PCR系统
6、Qiagen
(1)Rotor-Gene Q: 实时荧光定量PCR系统
(2)QIAquant 96 5plex: 实时荧光定量PCR系统
7、Analytik Jena
(1)Biometra TAdvanced: 高性能PCR仪
(2)Biometra TRobot: 自动化PCR系统
(3)qTOWER³: 实时荧光定量PCR系统
8、Takara Bio
(1)Thermal Cycler Dice Touch: 高性能PCR仪
(2)Thermal Cycler Dice Real Time System III: 实时荧光定量PCR系统
9、Bioer Technology
(1)GeneMax系列:GeneMax
(2)LineGene系列:LineGene 9600 Plus,LineGene K Plus
(3)XP Cycler: 高性能PCR仪
10、Techne (Bibby Scientific)
(1)TC-3000系列:TC-3000 Thermal Cycler,
(2)TC-5000系列:TC-5000 Thermal Cycler
(3)Prime系列:Prime Thermal Cycler,PrimeG Gradient Thermal Cycler
11、Abbott
(1)m2000系列:m2000 RealTime System
12、Cepheid
(1)SmartCycler II: 实时荧光定量PCR系统
(2)GeneXpert系列:GeneXpert Infinity,GeneXpert IV,GeneXpert XVI
13、 Fluidigm
(1)Biomark HD: 实时荧光定量PCR系统
(2)Juno System: 高通量PCR系统
14、Illumina
(1)Eco Real-Time PCR System: 实时荧光定量PCR系统
15、Bioneer
(1)Exicycler 96: 实时荧光定量PCR系统
(2)MyCycler: 高性能PCR仪
16、盛赛尔(Sansure Biotech)
(1)MA-6000系列:MA-6000 Real-Time Quantitative Thermal Cycler
(2)MA-688系列:MA-688 Real-Time Quantitative Thermal Cycler
(3)MA-7000系列:MA-7000 Real-Time Quantitative Thermal Cycler
(4)SLAN系列:SLAN-96P Real-Time PCR System,SLAN-48P Real-Time PCR System
(5)San-Q系列:San-Q5 Real-Time Quantitative Thermal Cycler,
San-Q3 Real-Time Quantitative Thermal Cycler
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